14株肿瘤细胞P53基因突变的检测

• 作者: 李惠明 王丰 田毓华 陈霞芳 韦芳 马家烈 黄倩
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤细胞 P53基因 基因突变
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 163-168
• 页数: 6页
• 分类号: R730.2
• 字数: 3400字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.02.014

摘要

目的:检测14株肿瘤细胞 P53基因的突变情况. 方法:根据 P53基因5～8外显子之间的内含子序列设计引物,分别对人肺癌、脑胶质瘤、肝癌、胃癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、脉络膜恶性黑素瘤、视网膜成细胞瘤等9种肿瘤14株细胞的 P53基因5、6、7、8的外显子进行PCR扩增反应.琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物;DNA测序,并与正常的DNA序列比较;抽提肿瘤细胞蛋白进行Western blotting检测P53蛋白的表达. 结果:14株肿瘤细胞 P53基因热变区5、6、7、8外显子的扩增产物经电泳鉴定与预期相同.DNA测序结果表明,14株肿瘤细胞中8株存在P53基因5～8外显子的突变,其中肺癌细胞H1299、肝癌细胞Hep3B、肝癌细胞SMMC7721、脉络膜恶性黑素瘤细胞OCM-1检测到以前未报道过的突变;突变主要发生在外显子的编码序列,多数为单个碱基替换导致的错义突变,也有部分表现为同义突变;2株正常细胞未检测到突变.Western blotting检测显示,有基因突变的8株肿瘤细胞中仅6株有P53蛋白表达;所有 P53基因未突变的肿瘤细胞株和正常细胞株均未检测到 P53蛋白. 结论: 检测的14株肿瘤细胞中有8株细胞P53基因热变区存在突变, 其中4株检测到以前未报道过的突变;2株正常细胞未发现P53基因突变.