应用RNA干扰技术抑制神经元E3B1基因表达及对轴突生长的影响

• 作者: 向强 吕宏琳 周跃 徐峰 李长青 郑文杰
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 E381 神经细胞 轴突
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 934-938,插三
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 5120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2008.12.015

摘要

目的:探讨应用RNA干扰(RNAi)技术抑制神经元E3B1基因表达及其对轴突生长的影响.方法:选择针对E381(NCBI:NM-024397)RNAi的3个靶位点Abil1、Abil2、Abil3和1个不针对任何mRNA的RNAi靶位点(阴性对照)以及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH,阳性对照),用带有neoR选择标志和GFP绿色荧光标志的真核表达载体pGenesil-1构建E381 RNAi质粒,分别转染培养的神经元,在荧光显微镜下观测转染率,经G418筛选得到单一的转染细胞,并用Western blot法检测各转染组神经元E3B1蛋白的表达情况,选出具有最佳抑制效应的siRNA转染神经元,加人轴突生长抑制物,观测轴突生长情况.结果:成功构建了RNAi质粒,各组细胞的转染率相近,均为34%左右.与阴性对照组相比,Abil1、Abil2和Abil3转染组细胞内E3B1 mRNA的表达都受到了不同程度的抑制,其中Abil3转染组细胞的E381 mRNA和蛋白的表达抑制最为显著,加入轴突抑制剂后Abil3转染组神经元轴突仍能继续生长.结论:应用RNA干扰技术能高效特异地抑制神经元E3B1基因的表达,E3B1基因的表达下调可促进神经元轴突的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周跃	第三军医大学新桥医院骨科	354	4854	36.0	56.0
2	向强	第三军医大学新桥医院骨科	35	143	7.0	10.0
3	李长青	第三军医大学新桥医院骨科	150	3060	30.0	51.0
4	郑文杰	第三军医大学新桥医院骨科	45	1306	16.0	36.0
5	吕宏琳	第三军医大学新桥医院骨科	6	30	3.0	5.0
6	徐峰	第三军医大学新桥医院骨科	4	19	3.0	4.0