Dicer 1转基因小鼠模型的建立

• 作者: 于洋 吕相川 周生来 张梅英 李兆阳 杨葳 汪瑛 王禄增 郑志红 高峰
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: Dicer1 显微注射法 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 258-260,插3
• 页数: 4页
• 分类号: R-33
• 字数: 2611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2008.04.005

摘要

目的 建立Dicer1转基因小鼠模型.方法 构建pcDNA3.I-Dicer1转基因构件,经酶切、纯化后通过显微注射方法导人BDF1小鼠受精卵原核并移植到同期受孕的ICR受体母鼠输卵管内.出生后仔鼠用PCR和Southern方法检测鼠尾DNA鉴定基因型,通过免疫组化检测Dicer1基冈表达.结果 显微注射172枚卵,移植119枚卵于3只受体输卵管中,2只怀孕,共产仔15只,经PCR检测获得6只阳性鼠,Southern榆测6只均为阳性.对Southern检测阳性转基因小鼠子代进行RT-PCR检测和免疫组化分析证明Dicer1基因在肝脏、肾脏、肺内均有表达.对腹腔肿胀的转基因阳性1号鼠解剖发现肝脏、脾脏明显增大,胚胎发育异常.结论 成功建立Dicer1基因表达的转基因小鼠模型,该模型为进一步研究DICER1基因功能及miRNA的表达及功能等奠定基础.