用蜂毒溶血肽和表皮生长因子构建膜毒性免疫毒素

• 作者: 何国庆 吴德 张佳佳 潘冰青 牛冬 王金玲 阮晖 陈启和 陈美龄
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 膜毒性免疫毒素 蜂毒溶血肽 表皮生长因子受体
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 390-394
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2008.03.005

摘要

表皮生长因子受体由于在许多种肿瘤细胞表面过度表达而成为特异杀伤肿瘤细胞的理想靶位;正电性抗菌肽有独特的膜毒性细胞毒机制.研究以小鼠(Mus musculus)表皮生长因子(mouse epidermal growth factor,MEOF)为导向部分,以蜂毒溶血肽(melittin,Mel)为毒性部分,构建特异杀伤肿瘤细胞的膜毒性免疫毒素MEGFMEL嵌合蛋白.该嵌合蛋白以大肠杆菌(Eschedchia coil)BL21为表达宿主,以pET30a为表达载体,采用低温诱导表达和无破胞程序的冻融法进行纯化,最终浓度为63.45μg/Ml、纯度为68%.体外活性检测表明,MEGFMEL嵌合蛋白对表面过度表达EGFR的肝癌A431细胞表现出显著杀伤力,其LD50为52.6μg/Ml.结果显示以正电性抗菌肽为毒性部分构建针对表皮生长因子受体的新型膜毒性免疫毒素(im-munotoxin,IT)是可行的.