肺炎链球菌ciaH/R基因重组表达及CiaH/R与β-内酰胺类耐药相关性

• 作者: 严杰 夏肖萍 孙爱华 李向阳 樊欢
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 链球菌,肺炎/药物作用 基因细菌 β内酰胺抗药性 二元信号传导系统 ciaH/ciaR基因 β-内酰胺类抗生素 耐药性
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 605-611
• 页数: 7页
• 分类号: R377.5
• 字数: 3989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2008.06.011

摘要

目的:构建肺炎链球菌ciaH和ciaR基因的原核表达系统,探讨CiaH和CiaR封闭后细菌耐药性变化.方法:采用PCR扩增全长ciaH和ciaR基因,以常规基因工程技术建立其原核表达系统.采用SDS-PAGE及Bio-Rad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rCiaH和rCiaR表达量.制备rCiaH和rCiaR兔抗血清及其IgG.检测IgG胞外或胞内封闭肺炎链球菌菌株CiaH和CiaR后,细菌对青霉素和头孢噻肟耐药性的变化.结果:与报道序列比较,所克隆的ciaH和ciaR基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.9%～100%和100%.所构建的工程菌E.coli BL21DE3pET42a-ciaH和E.coli BL21DE3pET42a-ciaR能高效表达目的重组蛋白rCiaH和rCiaR,其产量分别高达细菌总蛋白的33%和45%.rCiaH、rCiaR抗血清及其IgG免疫双扩散效价分别为1∶4、1∶4和1∶1、1∶1.CiaH-IgG胞外或胞内封闭CiaH、CiaR-IgG胞内封闭CiaR后,青霉素及头孢噻肟敏感菌株可出现对两种抗生素的耐药性,但对耐药菌株耐药性无明显影响.结论:成功地构建了肺炎链球菌ciaH/ciaR基因原核表达系统,为深入研究该TCS与耐药性关系奠定了基础.CiaH和CiaR均与肺炎链球菌对青霉素及头孢噻肟耐药性有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李向阳	温州医学院附属第二医院检验科	113	778	15.0	22.0
2	孙爱华		112	523	11.0	15.0
3	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
4	夏肖萍	浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科	9	57	4.0	7.0
5	樊欢	浙江大学医学院病原生物学系	3	15	2.0	3.0