鸡胚精原细胞体外转染EGFP方法的比较

• 作者: 何先红 余飞 倪黎纲 孙国波 孙鹏翔 李碧春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 精原细胞 增强型绿色荧光蛋白 体外转染
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 164-169
• 页数: 6页
• 分类号: S814.8
• 字数: 4566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.02.006

摘要

以增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞(Chicken embryonic spermatogonial cells,CESCs),比较磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法转染EGFP的效率,以获得高效的体外转染方法.本研究分离孵化16 d的鸡胚睾丸,获取CESCs,体外培养和传代扩增,传至第2代后进行碱性磷酸酶(AKP)活性和阶段特异性表面抗原-1(Stage specific embryonic antigen-1,SSEA-1)免疫荧光鉴定.运用磷酸钙、脂质体(梭华-Sofast)、电穿孔3种方法体外转染第2代CESCs,荧光细胞计数法分析转染效率.结果表明:与磷酸钙法、脂质体法相比,电穿孔法可获得更高的细胞成活率和转染率(68%vs39%、65%,19.70%vs2.92%、9.73%),差异显著(P<0.05).因此得出,电穿孔法是将外源基因导入鸡胚精原细胞的适宜方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李碧春	扬州大学动物科学与技术学院	189	1267	18.0	27.0
2	孙鹏翔	扬州大学动物科学与技术学院	10	40	4.0	6.0
3	孙国波	扬州大学动物科学与技术学院	10	22	3.0	4.0
4	余飞	扬州大学动物科学与技术学院	11	60	4.0	7.0
5	何先红	扬州大学动物科学与技术学院	7	49	4.0	7.0
6	倪黎纲	扬州大学动物科学与技术学院	13	80	6.0	8.0