CFSE标记人T细胞亚群增殖反应及其在病毒感染性疾病中的应用

• 作者: 吴昊 彭巧丽 曹振环 李海英 田亚坤 计云霞 陈新月
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: T淋巴细胞 CFSE 增殖反应
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 881-885
• 页数: 5页
• 分类号: R511
• 字数: 3436字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2008.12.001

摘要

目的 探讨应用流式细胞术和活体染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记人T细胞亚群增殖反应的方法学及其在病毒感染性疾病中的应用价值. 方法 用不同浓度的CFSE标记新鲜分离的人外周血单个核细胞(PBMC),分为未刺激组及刺激组.未刺激组加入CD28,刺激组加入CD28及不同浓度PHA,将细胞培养5～7 d后进行染色,采用流式细胞仪检测,观察CFSE、PHA标记的最佳浓度及最佳培养时间,采用CellQuest软件及ModFit软件分析T淋巴细胞各亚群的增殖情况,并对两种分析方法进行比较,在上述最佳实验条件下,采用相同的实验方法分析CMV-pp65肽刺激CMV-IgG(+)HLA-A2(+)者外周血单个核细胞(PBMC)后T细胞亚群增殖情况; 结果 CFSE标记人外周血单个核细胞(PBMC)的最佳浓度是0.5 μmol/L,PHA的最佳刺激浓度为2 μg/ml,在此浓度下,最佳培养时间为6 d,PHA刺激培养6 d后T细胞各亚群出现典型的增殖不同步现象,经CMV-pp65肽刺激后CD8+T细胞出现明显的增殖反应,采用CellQuest及ModFit软件联合分析,可实现淋巴细胞增殖分析的可视化及数量化. 结论 CFSE染色结合荧光抗体标记和流式细胞术是分析淋巴细胞增殖的有力工具,可以有效检测出病毒抗原刺激后T淋巴细胞各亚群的增殖反应及增殖动力学,在探讨病毒感染性疾病的发病机制中具有重要价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴昊		341	1409	17.0	25.0
2	计云霞		34	133	6.0	10.0
3	陈新月		138	660	13.0	18.0
4	田亚坤		12	50	4.0	6.0
5	曹振环		28	140	7.0	11.0
6	李海英		24	98	5.0	9.0
7	彭巧丽		2	1	1.0	1.0