实时定量RT-PCR检测鱼类传染性造血器官坏死病毒方法的建立与应用

• 作者: 刘荭 岳志芹 徐彪 梁成珠 江育林 邓明俊 高宏伟
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 传染性造血器官坏死病毒(IHNV) 实时定量RT-PCR Taqman探针
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 页码范围: 91-95
• 页数: 5页
• 分类号: Q-31
• 字数: 4050字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3207.2008.01.015

摘要

建立了Taqman 实时定量RT-PCR方法检测传染性造血器官坏死病毒(IHNV).选取IHNV病毒的N蛋白基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针.以梯度稀释的含有IHNV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量RT-PCR反应以确定检测灵敏度.病毒浓度在5×106 -5个拷贝,共7个数量级的范围内,定量RT-PCR反应有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为5个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对鲤春血症病毒(SVCV)、病毒性出血性败血症(VHSV)、传染性胰脏坏死病毒(IPNV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、EPC细胞系、牙鲆的核酸都没有扩增反应.在50批待检样品中,有3批鱼类感染IHNV,利用标准曲线进行了定量分析.实时定量RT-PCR检测IHNV方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在鱼病的快速检测上具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁成珠		21	225	8.0	14.0
2	刘荭		37	488	14.0	21.0
3	高宏伟		8	73	4.0	8.0
4	江育林		20	315	10.0	17.0
5	徐彪		9	63	3.0	7.0
6	岳志芹		1	34	1.0	1.0
7	邓明俊		1	34	1.0	1.0