昆明小鼠胰腺导管上皮细胞转分化为胰岛样细胞的实验研究

• 作者: 秦贵军 罗方 董义光 贾贺堂 赵艳艳
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺 干细胞 胰岛 转分化 小鼠
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 497-500
• 页数: 4页
• 分类号: R335
• 字数: 2566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2008.03.029

摘要

目的:培养小鼠胰腺导管上皮细胞并使之转分化为胰腺干细胞及胰岛样细胞,为胰岛移植治疗糖尿病提供细胞来源.方法:分离培养昆明小鼠胰腺导管上皮细胞,以添加有角化细胞生长因子(KGF)、肝细胞生长因子(HGF)和烟酰胺的DMEM/F12培养基培养,分别于光镜和电镜下观察细胞形态和超微结构的变化.采用细胞免疫化学染色检测第1天和16天时CK-19、PDX-1蛋白的表达,RT-PCR检测第1天和16天时胰岛素和胰高血糖素基因的表达,第21天行双硫腙染色试验及葡萄糖刺激的胰岛素释放试验.结果:培养第7～10 d,细胞快速增殖成鹅卵石样;培养第16～21 d,细胞逐渐聚集,最终形成胰岛样细胞团;培养第16 d,细胞超微结构的变化表明上皮细胞在向干细胞转分化.免疫化学染色显示,分离第1天,大部分细胞CK-19染色阳性,偶见PDX-1弱阳性细胞,第16天时,CK-19阳性细胞快速增殖形成细胞团,大部分细胞PDX-1染色阳性.RT-PCR显示培养第16天,细胞胰岛素和胰高血糖素表达较培养第1天明显增强(P<0.01).培养第21天,胰岛样细胞团更加成熟,双硫腙着色阳性,且在高糖(15 mmol/L)刺激下的胰岛素释放较低糖(5.6 mmol/L)刺激时增加了1.6倍(P<0.05).结论:小鼠胰腺导管上皮细胞在体外培养条件下可增殖,并具有干细胞潜能,可转分化为胰岛素分泌细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦贵军	郑州大学第一附属医院内分泌科	172	638	12.0	18.0
2	董义光	郑州大学第一附属医院内分泌科	34	139	6.0	10.0
3	赵艳艳	郑州大学第一附属医院内分泌科	26	60	5.0	6.0
4	贾贺堂	郑州大学第一附属医院内分泌科	10	31	4.0	5.0
5	罗方	郑州市第四人民医院内分泌科	2	3	1.0	1.0