[目的]观察氨甲喋呤联合咖啡因对骨肉瘤细胞株的作用.[方法]以国人骨肉瘤细胞株OS-732细胞为研究对象,根据析因试验设计原因,设1无药组(阴性对照组),2咖啡因组,3氨甲喋呤组,4咖啡因、氨甲喋呤联合用药组(混合用药组).培养一段时间后,分别采用MTY法细胞毒性试验和流式细胞仪(FCM)分析,观察3组药物对细胞的毒性(用残存细胞吸光度A值表示)及细胞周期的影响.[结果]FCM分析各组于48 h G2/M期细胞比例(%)为1组(23.210±0.416),2组为(23.120±0.440),3组为(28.770±0.531),4组(23.267±0.319),1组与2组间差异无统计学意义,其余各组间差异有统计学意义(P<0.01).各组残存细胞吸光度A值为1组(0.411±0.006),2组(0.401±0.006);3组(0.304±0.007),4组(0.105±0.002),组间差异及交互作用有统计学意义(P<0.01).[结论]氨甲喋呤与咖啡因具有协同作用,可增加氨甲喋呤对骨肉瘤细胞株的抑制率.