慢病毒介导的中性内肽酶对Aβ诱导的SK-N-SH细胞凋亡的影响

• 作者: 丁岩 任凯 崔云燕 崔行 张亚伦 杨玲玲 段珊 邵世滨
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 中性内肽酶 慢病毒载体 β淀粉样肽 细胞凋亡 阿尔茨海默病
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2470-2474
• 页数: 5页
• 分类号: R741.02
• 字数: 3688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.12.037

摘要

目的:探讨脑中性内肽酶(NEP)外源表达对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响.方法:采用脂质体法将含中性内肽酶NEP的四质粒系统慢病毒载体转染293FT包装细胞,制备高滴度病毒载体,感染Aβ处理的SK-N-SH细胞,用Western blotting方法检测NEP对Aβ的降解作用、MTT法检测细胞存活率、流式细胞术分析细胞凋亡情况、RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2及bax的表达及caspase-3活性检测.结果:胞内高表达的NEP能够显著降解Aβ,其降解程度与NEP的表达量有剂量依赖关系.细胞存活率及流式细胞术检测结果显示NEP高表达可减轻Aβ诱导的细胞凋亡,细胞存活率于感染病毒后48 h最强,为对照的170%(P<0.01),NEP活性组的凋亡率为3.86%,低于对照组的6.41%;RT-PCR结果显示NEP对Ap诱导的细胞凋亡保护作用可能是通过减少bax的表达,抑制了easpase一3的激活程度来实现的.结论:NEP可以降解A13,可以保护由AB沉积所致的神经细胞凋亡.