豚鼠离体活外毛细胞内电位的观察

• 作者: 江继平 黄以乐
• 来源期刊: 中国医学物理学杂志
• 关键词: 豚鼠 耳蜗 外毛细胞 电位
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 医学生物物理与临床应用
• 页码范围: 823-824,827
• 页数: 3页
• 分类号: R33
• 语种: 中文

摘要

目的:为了观察了解豚鼠耳蜗外毛细胞内电位情况,从而进一步去探讨耳蜗活外毛细胞将声音由声能转化成电信号的机制.方法:将豚鼠断头活杀快速取出双侧颞骨听泡于Hank液中(pH7.4,渗透压300 moSm),在解剖显微镜下打开听泡及耳蜗,取出3-4回基底膜于浓度为0.25 mg/mL的Ⅳ型胶原酶(Sigma产品)中,在室温下消化10 min,用hank液洗涤2次以终止消化.取终止消化后的细胞悬液1 mL与等体积浓度为5 μmol的DiBAC4(3)(用Hank液配制)混合(终浓度为2.5 μmol),在37℃下避光染色20 min.取染色后的细胞悬液20μL加入预先涂有0.25 mg/mL多聚赖氨酸(sigma产品),在室温下干燥后的ACAS570特制培养皿中,使染色后的外毛细胞粘附于培养皿底部.选一活性良好、附壁牢固的外毛细胞,使用ACAS570在40x物镜下,动态观察膜电位探针DiBAC4(3)指示的外毛细胞内的荧光强度,共观察32个活性良好的外毛细胞,实验全过程均在室温(20℃～25℃)下完成,实验结束时细胞仍保持良好的活性.结果:豚鼠离体耳蜗活外毛细胞在Hank液中呈圆柱体并能保持良好的活性.用膜电位分子探针DiBAC4(3)染色后的外毛细胞内荧光强度不等,且位于细胞底部细胞核处荧光最强,位于细胞顶端的表皮板处荧光相对较弱,位于两者之间的散在区域荧光强度界于细胞核和表皮板之间.这些荧光强度不同的散在区域可能是各种具备单位膜结构的细胞器.提示豚鼠耳蜗离体活外毛细胞内各细胞器及细胞质内电位不同.结论:豚鼠耳蜗离体活外毛细胞内电位不同的各个部位分别是细胞核、表皮板及其他具备膜性结构的细胞器.这种各细胞器内电位呈梯度分布特征可能与外毛细胞完成声-电转换的需要密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江继平	北京市305医院耳鼻咽喉科	1	0	0.0	0.0
2	黄以乐	广州市珠江医院耳鼻咽喉科	1	0	0.0	0.0