5-杂氮-2'-脱氧胞苷诱导EJ细胞RUNX3基因组蛋白甲基化改变

• 作者: YANG Na 李智
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱肿瘤 组蛋白类 甲基化 氮杂化合物 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（32）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2295-2298
• 页数: 4页
• 分类号: R9
• 字数: 3802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0376-2491.2008.32.016

摘要

目的 探讨DNA甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人膀胱癌EJ细胞Runt相关转录因子3(RUNX3)基因组蛋白甲基化和基因表达的影响.方法 培养人膀胱癌EJ细胞,用不同浓度5-Aza-CdR干预细胞.采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法观察5-Aza-CdR对EJ细胞增殖活性的影响;通过染色质免疫沉淀技术分析干预前后RUNX3基因启动子区和第2个外显子区组蛋白H3第9位赖氨酸(H3-K9)的甲基化状态;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测干预前后RUNX3基因的表达.结果5-Aza-CdR对EJ细胞生长的抑制作用呈现剂量依赖性和时间依赖性,在浓度为0.1、0.5、1.0、2.0、5.0和10.0 μmol/L时,细胞存活率分别为:98.1%,95.3%,75.9%,52.3%,16.2%和7.7%,在时间为12、24、36、48、72、96 h的细胞存活率分别为:89.4%,85.2%,78.6%,37.1%,8.9%,7.1%,其中浓度为1.0、2.0、5.0、10.0 μmol/L组与对照组(5-Aza-CdR 0 μmol)相比,差异有统计学意义(P<0.05).EJ细胞存在RUNX3基因组蛋白H3-K9的三甲基化和RUNX3基因表达的缺失;2.0 μmol/L 5-Aza-CdR干预细胞后RUNX3基因启动子区和第2个外显子区组蛋白H3-K9发生去甲基化,基因恢复表达.结论 5-Aza-CdR对人膀胱癌EJ细胞生长增殖有明显的抑制作用;并可能通过诱导RUNX3基因组蛋白H3-K9的去甲基化使基因重新表达,组蛋白H3-K9三甲基化可能是该基因失活的重要原因之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李智	上海同济大学附属第十人民医院检验科	7	12	2.0	3.0