无乳链球菌SIP基因的克隆和原核表达

• 作者: 乔军 刘君 曹旭东 褚明亮 陈创夫
• 来源期刊: 塔里木大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 无乳链球菌 表面免疫相关蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 3297字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0568.2008.03.005

摘要

目的重组表达无乳链球菌表面免疫相关蛋白(Surface immunogenic protein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白.方法用PCR的方法从石河子分离株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入PBST载体,并构建原核表达载体pET-32a(+)-SIP.用BL21(DE3)/pET系统表达Trix-SIP融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物.结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中无乳链球菌(DQ650634)的SIP的基因序列同源性为98.62%.SDS-PAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET-32a(+)-SIP总蛋白中出现一条相对分子质量为71KDa的新蛋白带.West-ern blot分析显示,SIP蛋白可与无乳链球菌多克隆抗血清发生特异性反应.结论已成功表达SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹旭东	石河子大学医学院	25	84	6.0	8.0
2	刘君	石河子大学动物科技学院	2	2	1.0	1.0