myocardin在骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化过程中的表达

• 作者: 余俊 孟寒 李燕 瞿智玲 阮秋蓉 黄冠
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 间质干细胞 肌细胞,平滑肌 培养基,条件性 血清
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 680-686
• 页数: 7页
• 分类号: R3
• 字数: 6967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-5807.2008.10.008

摘要

目的 探讨通过条件培养液(CM)和高浓度血清即20%的胎牛血清(FBS)联合作用下,myocardin在骨髓来源的间充质干细胞向平滑肌细胞(SMC)定向分化过程中的表达特点.方法 采用伞骨髓贴壁法分离骨髓问充质干细胞,CM联合20%FBS诱导骨髓间充质干细胞,同时设立持续10%FBS、单20%FBS及单CM诱导下的骨髓间充质十细胞对照组和SMC阳性对照组,分别于诱导前及诱导3、7、10和14 d时观察细胞形态的变化,并在相应的时间点用免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应法、Western blot半定量分析法榆测myocardin以及SMC表面各种标志基因的表达变化,用透射电镜检测诱导后细胞内肌丝存在以此来证实诱导分化成功.结果 光镜观察显示诱导前至诱导3、7、10和14 d时,骨髓问允质十细胞南纺锤形、多角形、扁平形和小圆形等多种形态逐渐转变为单一的长梭形,在诱导21 d后显示出明显的峰-谷特征.免疫荧光结果显示表达myocardin的阳性细胞数量逐渐增多,表达部位由胞质逐渐移向胞核,而表达平滑肌标志基因Ot一平滑肌肌动蛋白(Ot.SMA)、平滑肌肌动蛋白重链(SM-MHC)的细胞也随之增加,同时联合诱导后3、7、lO和14 d表达myocardin和平滑肌标志基因(α-SMA或SM-MHC)的双阳性细胞数最逐渐增加.RT-PCR结果显示myocardin的mRNA表达逐渐上调,在诱导7 d达到高峰后表达基本稳定(P<0.05);平滑肌标志基因α-SMA及SM22α的表达随着myocardin表达上调而增加(r=O.81,P<0.05),诱导10 d后表达基本稳定.Western blot结果显示myocardin蛋白和平滑肌标志基因α-SMA蛋白表达量在诱导后明显增加(r=0.84,P<0.05).透射电镜结果显示诱导21 d后的分化细胞中有肌丝的存在.在不同时间点各组之间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 CM联合高浓度的血清可有效诱导骨髓间充质干细胞向SMC分化,myocardin在此分化过程中起了重要作用.骨髓来源的间充质干细胞可以在诱导下定向分化成为SMC.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮秋蓉	华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所	50	390	11.0	18.0
2	瞿智玲	华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所	40	249	8.0	13.0
3	李燕	华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所	35	137	7.0	10.0
4	余俊	华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所	34	224	7.0	14.0
5	孟寒	华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所	4	7	2.0	2.0
6	黄冠	华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所	5	10	2.0	2.0