益智ISSR-PCR反应体系建立与优化

• 作者: 刘晓静 王文泉 郭凌飞
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 益智 ISSR-PCR 正交设计 单因素试验 体系优化
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 4311字
• 语种: 中文

摘要

目的:获得适合的益智ISSR-PER扩增反应体系.方法:利用正交设计L16(45)和单因素试验对益智ISSR-PER反应体系的5因索(Taq酶,Mg2+,模板DNA, dNTPs,引物)在4个水平上进行优化试验,将二者所得结果进行综合比较分析.结果:最终获得益智ISSR-PER反应的最优体系(20μl)为:模板DNA 100ng, Mg2+ 3.0mmol/L,引物0.8μmol/L, dNTPs 0.25mmol/L, Taq DNA聚合酶1.0U.最后,对益智ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火,得到最佳退火温度为50℃.结论:这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术研究分析益智遗传多样性奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭凌飞	中国热带农业科学院南亚热带作物研究所	6	132	6.0	6.0
5	王文泉	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	74	886	18.0	26.0
6	刘晓静	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	5	53	4.0	5.0