利用正交设计优化小苍兰ISSR-PCR反应体系

• 作者: 刘群录 吴晨炜 周凌瑜 唐东芹 宋会书
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 农学
• 关键词: ISSR-PCR 小苍兰 优化 正交设计
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 402-407
• 页数: 6页
• 分类号: S718.46|Q943.2
• 字数: 4009字
• 语种: 中文

摘要

通过L16(45)正交试验,研究了镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度这5个因素在4个水平上对ISSR-PCR的影响,建立了适合于小苍兰ISSR-PCR的反应体系.优化体系为:25μLPCR反应体系中含有1×Taq酶缓冲液(10 mmol·L-1KCl,8 mmol·L-1(NH4)2SO4,10 mmol·L-1Tris·HCl,pH 9.0,0.05%NP-40),2 mmol·L-1MgCl2,0.06 U·μL-1Taq酶,0.4 μmol·L-1引物,4.0 ng·/μL-1模板DNA,dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.6 mmol·L-1.利用温度梯度PCR,确定了最适宜的退火温度为51.5℃.该优化体系的建立为下一步对小苍兰进行ISSR分子标记奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐东芹	上海交通大学农业与生物学院园林科学与工程系	71	1250	18.0	34.0
2	刘群录	上海交通大学农业与生物学院园林科学与工程系	14	132	5.0	11.0
3	周凌瑜	上海交通大学农业与生物学院园林科学与工程系	3	74	2.0	3.0
4	吴晨炜	上海交通大学农业与生物学院园林科学与工程系	2	51	1.0	2.0
5	宋会书	上海交通大学农业与生物学院园林科学与工程系	2	51	1.0	2.0