均匀设计优化黑木相思ISSR-PCR体系

• 作者: 林思祖 林来水 胡薇 陈宇
• 来源期刊: 福建师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑木相思 均匀设计 ISSR-PCR
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 页码范围: 78-83
• 页数: 6页
• 分类号: Q949.662
• 字数: 4356字
• 语种: 中文

摘要

采用均匀设计,对影响黑木相思ISSR-PCR体系的引物、Mg2+、dNTP、Taq DNA聚合酶和模板DNA浓度等进行5因素5水平和5因素3水平两轮优化,建立了适合于黑木相思ISSR-PCR的体系:在20 μL反应体系中,含引物0.30 μmol·L-1,Mg2+ 3.00 mmol·L-1,dNTP 0.15 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶0.75 U,模板DNA 2.00 ng·μL-1.在此基础上对扩增程序中的循环次数、退火温度、退火时间进行筛选,获得的扩增程序为:94 ℃预变性5 min;接着进行33个循环:94 ℃变性35 s,52～61.5 ℃退火52 s,72 ℃延伸90 s;循环结束后,72 ℃延伸10 min.同时筛选得到10个扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林思祖	福建农林大学林学院	167	2561	24.0	42.0
2	胡薇	福建农林大学林学院	38	164	7.0	12.0
6	陈宇	福建农林大学林学院	11	33	3.0	5.0
7	林来水	福建农林大学林学院	2	7	2.0	2.0