结核分枝杆菌Ag85B基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

• 作者: 付小强 吴少庭 李晓恒 王芳 甘燕 雷蕾
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌,结核 Ag85B 分枝杆菌,耻垢 重组BCG
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 721-724
• 页数: 4页
• 分类号: R378.911
• 字数: 3228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2008.10.001

摘要

目的 体外扩增结核杆菌Ag85B基因,构建大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-Ag85B,并重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis mc2155). 方法 采用聚合酶链式反应(PCR)方法,体外扩增结核杆菌Ag85B基因,克隆入pGEMT载体;构建亚克隆ps3000-Ag85B大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒,电转化方法将有Ag85B基因的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌中.热诱导此重组耻垢分枝杆菌,用SDS-PAGE电泳观察Ag85B蛋白的表达,Western blot鉴定其生物学活性. 结果 PCR扩增结核杆菌Ag85B基因片段大小为990 bp,构建的穿梭质粒ps3000-Ag85B酶切片段为990 bp,与理论值相符.经Western blot检测,该重组耻垢杆菌表达蛋白能被结核病患者血清识别. 结论 Ag85B重组耻垢分枝杆菌构建成功,为下一步表达Ag85B蛋白的重组BCG(Bacilli Calmette-Guérin)疫苗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴少庭		72	281	9.0	12.0
2	王芳	华中科技大学同济医学院	265	1801	22.0	29.0
3	李晓恒		50	174	7.0	9.0
4	甘燕		7	20	3.0	4.0
5	雷蕾	华中科技大学同济医学院	42	267	7.0	16.0
6	付小强	华中科技大学同济医学院	3	9	1.0	3.0