人胚神经干细胞的长期培养与基因修饰

• 作者: 徐永清 林月秋 汤逊 阳运康
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 人胚脑皮层 培养 逆转录病毒 转染
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 41-46
• 页数: 6页
• 分类号: R511.5
• 字数: 3874字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2008.03.010

摘要

目的 通过逆转录病毒将增强绿色荧光蛋白 (EGFP) 基因转染人胚神经干细胞,观察其生物学特性与体内表达情况.方法 分离孕10～20周人胚脑皮层来源的神经干细胞并连续传代培养,通过克隆试验、免疫组织化学等方法检测其生长特性及增殖能力;使用构建了EGFP基因的逆转录病毒转染神经干细胞并检测其生物学特性;制备兔T9全横断脊髓损伤模型,观察携带EGFP基因的人胚神经干细胞在体内的表达情况.结果 从胎龄10～20周的人胚脑皮层中成功分离出人胚神经干细胞,该细胞具有连续克隆能力及多分化潜能,表达干细胞及分化细胞的特异性抗原.转染EGFP基因后,仍保持未分化状态,能够自我更新形成新的神经球;移植入兔脊髓损伤模型后,仍高效表达转染基因蛋白,并在体内发生增殖、迁移.结论 人胚脑皮层中存在能长期传代培养的神经干细胞;转染EGFP基因后仍保留神经干细胞的基本特性;移植人体内能持续、高效表达EGFP,有利于观察其存活、迁移情况,并为功能基因修饰与移植研究提供了方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐永清	成都军区昆明总医院骨科	329	2370	23.0	32.0
2	汤逊	成都军区昆明总医院骨科	65	403	11.0	18.0
3	林月秋	成都军区昆明总医院骨科	126	509	13.0	17.0
4	阳运康	泸州医学院附属医院骨科	31	139	7.0	10.0