摘要:
目的 已证实1,25(OH)2D3可以诱导HL-60细胞向成熟单核细胞分化,但其不足之处是高钙血症和形成耐药株.该实验应用鼠尾草酸(CA)联合1,25(OH)2D3研究对HL-60细胞分化的影响及引起细胞内活性氧(ROS)水平和细胞内钙离子浓度的改变.方法 应用鼠尾草酸,1,25(OH)2D3单独和联合应用处理HL-60细胞,共分为5组:空白对照组;低浓度1,25(OH)2D3(1 nmol/L)组、鼠尾草酸组;联合处理组(10 μmol/L鼠尾草酸和1 nmol/L 1,25(OH)2D3);高浓度1,25(OH)2D3(100 nmol/L)组.每24 h监测1次,通过四唑氮蓝(MTT)法观察细胞生长,共72 h;收集处理后72 h的HL-60细胞,通过光学显微镜观察细胞形态,用流式细胞仪(FCM)检测不同处理组细胞周期及单核细胞分化标记CD14的表达,ROS和细胞内钙离子浓度.结果 72 h后,联合处理组HL-60细胞与空白对照组相比,细胞增殖明显受抑制(Ab=0.560±0.020;P<0.01),细胞形态具有成熟单核细胞特征,CD14的表达率升高(57.62%;P<0.01),G0/G1期细胞显著增多,ROS水平下降[(52.67±10.76)%,P<0.01];联合处理组细胞内钙离子水平同空白对照组比较差异无显著性(115.64±17.74 nmol/L,P>0.05),但与高浓度1,25(OH)2D3组相比细胞内钙离子水平明显下降(P<0.01).结论 鼠尾草酸可增强1,25(OH)2D3对HL-60细胞的诱导分化、增强抑制HL-60细胞增殖作用,细胞阻滞于G0/G1期,细胞内活性氧水平降低,这可能与细胞的诱导分化机制有关,且这一联合作用不增高细胞内钙离子水平.