电穿孔法基因转染K562细胞条件的优化

• 作者: 张广森 朱剑锋 李睿娟 龚凡杰
• 来源期刊: 实用临床医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 电穿孔 K562细胞 转染 优化
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 43-45,49
• 页数: 4页
• 分类号: R55
• 字数: 3664字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2008.09.011

摘要

目的 以绿色荧光蛋白(GFP)为观察指标优化K562细胞的电穿孔基因转染条件.方法 通过改变悬液体积、温度及缓冲液、质粒浓度等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒DNA转入K562细胞,通过流式细胞仪和荧光显微镜观察转染效率.结果 ①在电压250 V、电容950ìF的条件下,K 562细胞得到58.6%的最大转染率.②应用0.4 mL细胞悬液体积,当质粒浓度≥20ìg/mL时可得到较高的转染效率.③温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大.结论 电穿孔是一种高效的基因转染法,通过优化条件,可提高转染率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张广森	中南大学湘雅二医院血液科	80	423	10.0	16.0
2	龚凡杰	中南大学湘雅二医院血液科	10	42	4.0	6.0
3	朱剑锋	中南大学湘雅二医院血液科	5	25	3.0	5.0
4	李睿娟	中南大学湘雅二医院血液科	11	42	4.0	6.0