微孔板化学发光酶免疫分析法定量检测肿瘤标志物CA72-4的方法学研究

• 作者: 林金明 梁淑轩 王栩 辛天兵 靳辉 高鹏
• 来源期刊: 科学通报
• 关键词: 化学发光酶免疫分析 肿瘤标志物 CA72-4 人血清
• 年，卷（期）: 2008,（13）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 1538-1543
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

建立了一种高灵敏、高特异检测人血清中肿瘤标志物CA72-4的微孔板化学发光酶免疫分析法.采用双抗体夹心反应模式,以过氧化氢(H2O2)-鲁米诺(luminol)化学发光体系作为检测体系,以辣根过氧化物酶作为标记物,测定简便、快速.对几种物理化学参数,如温育条件、抗体包被条件、酶标记物稀释度和发光反应时间进行了考察和优化.结果显示方法的线性范围为0～200 U/mL,相关系数0.9995,检出限为0.18 U/mL,批内、批间变异均小于10%.检测CA72-4的临床低值血清回收率为98.5%,高值血清回收率为101.3%,显示了良好的准确性.与人体血清中常见肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),CA24-2,CA19-9,CA15-3无明显交叉.为了验证该法用于构建临床诊断试剂盒的可行性,对所用试剂进行了37℃下的7d热稳定性考察,各技术指标与4℃放置7d无明显差异.对50例临床血样进行了测定,并与进口酶联诊断试剂盒测值呈良好相关(r2=0.9383).这些结果均表明该方法稳定、可靠、实用,可以满足商品化试剂盒的开发,在临床CA72-4检测及癌症辅助诊断中具有较高的应用价值.