鸭梨多酚氧化酶基因CDS区的克隆及表达

• 作者: 刘坤 张玉星 李会宣 李桂琴 许冬倩
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭梨 多酚氧化酶 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 577-580
• 页数: 4页
• 分类号: S661.2
• 字数: 3473字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9980.2008.04.025

摘要

以鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.)果皮基因组DNA为模板,根据已经发表的多酚氧化酶(polyphenol oxi-dase,PPO)基因保守序列设计引物,利用PCR技术,克隆得到鸭梨多酚氧化酶编码区序列,将此核酸序列克隆到载体pGEM-T,酶切鉴定后测序,结果表明该段序列含有1 782个核苷酸,编码593个氨基酸.对鸭梨多酚氧化酶基因片段的一致性分析和进化树分析表明,该片段与沙梨(Pyrus pyrifolia,AB056680)、苹果(Mdus domestica,L29450)、李(Prunus salicina,AY866432)以及杏(Prunus armeniaca,AF020786)的一致性分别为99％、96.3％、82％和51.4％,绘制的进化树和形态学分类地位相一致.将该片段连接到表达载体pET39b上,获得的重组子命名为pET39b-PPO,热激法转化表达受体大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG进行诱导.SDS-PAGE分析表明,PPO基因在大肠杆菌中被诱导表达蛋白质相对分子质量约66 ku,检测表明具有多酚氧化酶的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉星	河北农业大学园艺学院	105	1012	18.0	26.0
2	刘坤	河北经贸大学生物科学与工程学院	37	182	7.0	12.0
3	李会宣	河北经贸大学生物科学与工程学院	15	73	5.0	8.0
4	李桂琴	河北经贸大学生物科学与工程学院	39	209	8.0	13.0
8	许冬倩	河北经贸大学生物科学与工程学院	12	60	4.0	7.0