大鼠耳蜗血管纹缘细胞氧化性损伤体外模型的建立

• 作者: 孔维佳 李隽 胡钰娟 赵雪艳
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管纹 细胞,培养的 过氧化氢 氧化性应激 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 835-839
• 页数: 5页
• 分类号: R76
• 字数: 5139字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-0860.2008.11.009

摘要

目的 建立大鼠耳蜗血管纹缘细胞氧化性损伤的体外模型.方法 在体外培养的大鼠耳蜗血管纹缘细胞中加入过氧化氢(H2O2),观察细胞形态结构变化;采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测200、300、400、600、800μmoL/LH2O2作用0.5、1、2、4、16、24 h对血管纹缘细胞活性的影响;检测不同浓度H2O2作用2 h后血管纹缘细胞脂质过氧化产物丙二醛含量的变化;利用碘化丙锭染色流式细胞仪测定细胞的凋亡率;通过免疫印迹法(Western blot)检测凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cmpase-3)活化片段cleaved-caspase-3的表达.结果 H2O2作用后血管纹缘细胞出现核固缩、边缘化,胞质浓缩,被膜包裹、隆起,产生凋亡;随着H2O2浓度的增加、作用时间的延长,缘细胞活性降低;200 μmol/L的H2O2作用2 h,即可诱导缘细胞凋亡率升高,差异具有统计学意义(P<0.05);cleaved-caspase-3在正常缘细胞呈微弱表达,H2O2作用后cleaved-caspase-3表达增强,并随H2O2浓度的增高而增强,但当H2O2达到600 μmol/L时,表达开始减弱,800 μmol/L时仅见微弱表达.结论 利用H2O2可成功建立耳蜗血管纹缘细胞氧化性损伤的体外模型,caspase-3的激活参与了缘细胞的氧化损伤过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔维佳	华中科技大学同济医学附属协和医院耳鼻咽喉科	278	1805	21.0	28.0
2	李隽	武汉市妇女儿童医疗保健中心耳鼻咽喉科	16	69	6.0	7.0
3	赵雪艳	华中科技大学同济医学附属协和医院耳鼻咽喉科	2	1	1.0	1.0
4	胡钰娟	华中科技大学同济医学附属协和医院耳鼻咽喉科	16	45	4.0	6.0