细菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因定点突变对酶活性的影响研究

• 作者: 凌保东 周岐新 张翔 谢勇恩 陈大斌 雷军
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 超广谱β-内酰胺酶 CTX-M基因 定点突变 酶活性
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 232-234,246
• 页数: 4页
• 分类号: R978.1+1
• 语种: 中文

摘要

目的 构建CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因突变体,比较突变前、后酶活性的变化,进一步阐明酶的分子结构特征和生化特性.方法 利用重叠延伸PCR定点诱变技术将CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因Ser240(丝氨酸)AGC定点突变为Gly240(甘氨酸)GGC,分别构建CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体,重组载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后,转化大肠埃希菌JM109,比较突变前、后酶活性的改变.结果 酶切鉴定和DNA测序鉴定表明CTX-M型酶的原核重组表达载体及其突变表达载体构建成功,转化大肠埃希菌JM109后,发现含野生型CTX-M基因的重组菌其酶活性与来源菌株相近,而含突变型CTX-M基因的重组菌未检测到酶活性.结论 Ser240对于维持CTX-M型超广谱β-内酰胺酶活性具有重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凌保东	川北医学院药物研究所	74	681	13.0	23.0
2	周岐新	重庆医科大学药理学教研室	190	1564	18.0	29.0
3	张翔	川北医学院药物研究所	43	175	8.0	10.0
4	雷军	川北医学院药物研究所	64	171	7.0	8.0
5	谢勇恩	川北医学院药物研究所	35	94	6.0	7.0
6	陈大斌	重庆医科大学药理学教研室	18	74	5.0	8.0