北方黑土土壤细菌16S rDNA扩增体系的优化

• 作者: 吴凤芝 李秋红
• 来源期刊: 土壤学报
• 学科: 农学
• 关键词: 土壤细菌16S rDNA 降落PCR 优化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 页码范围: 341-347
• 页数: 7页
• 分类号: S154.3
• 字数: 3402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0564-3929.2008.02.021

摘要

采用降落PCR方法扩增目的基因,设计两次正交试验对PCR反应体系中的各组分浓度进行筛选,同时对退火时间、延伸时间及循环次数进行摸索.结果表明,适合北方黑钙土土壤细菌16S rDNA扩增体系为:在25 μl体系中,10×buffer2.5 μl,DNA模板20 ng,Mg2+2.5 mmol L-1,dNTPs0.25 mmol L-1,引物0.3 μmol L-1,TaqDNA聚合酶1.5 U.降落PCR扩增程序为:95℃,5 min;95℃,45 s;65～56℃,60 s;72℃,90 s;每两个循环降低1℃.95℃,45 s;55℃,60 s;72℃,90 s;10个循环.最后72℃,10 min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴凤芝	东北农业大学园艺学院	189	5115	34.0	67.0
2	李秋红	东北农业大学园艺学院	2	34	2.0	2.0