小金海棠二价铁转运蛋白基因MxIRT1定点突变的研究

• 作者: 孔瑾 张学宁 王忆 许雪峰 韩振海
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小金海棠 基因突变 定点突变技术 二价铁转运蛋白基因 缺铁病
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 189-194
• 页数: 6页
• 分类号: S665.2
• 字数: 3877字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0513-353X.2008.02.006

摘要

采用PCR技术对小金海棠(Malus xiaojinensis)二价铁转运蛋白基因MxIRT1的定点突变体系进行了探讨.根据MxIRT1开放阅读框(ORF)两端和突变位点序列各设计一对引物.通过PCR扩增,获得带有突变位点且在突变位点相互重叠的两个PCR片段.对以上两个片段的浓度进行调整后,将其用作PCR反应的模板.对退火温度和延伸时间进行优化后,利用ORF两端引物,将带有突变位点的两个片段拼接起来,从而获得了含有所要突变位点的MxIRT1,并将其插入pEASY-T2载体中.DNA序列分析表明在预期位点上已经发生了突变:MxIRT1编码的第186位密码子已由组氨酸残基变为丙氨酸残基,证明用PCR技术已成功地使MxIRT1基因发生突变.整个突变过程不需要任何回收与纯化步骤,是一个高效、快捷的定点突变体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王忆	中国农业大学果树逆境生理与分子生物学实验室	57	614	14.0	22.0
2	韩振海	中国农业大学果树逆境生理与分子生物学实验室	156	3213	31.0	48.0
3	许雪峰	中国农业大学果树逆境生理与分子生物学实验室	84	2000	25.0	40.0
4	孔瑾	中国农业大学果树逆境生理与分子生物学实验室	18	169	9.0	12.0
5	张学宁	中国农业大学果树逆境生理与分子生物学实验室	3	2	1.0	1.0