弓形虫RH株体外培养及速殖子与缓殖子相互转化体系的建立

• 作者: 吴焜 王琼 程璐 郝丽 陈晓光
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 体外培养 速殖子 缓殖子 转化
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 612-615,620
• 页数: 5页
• 分类号: R382.5
• 字数: 4086字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.07.005

摘要

目的 建立弓形虫RH株体外培养及速殖子与缓殖子相互转化体系.方法 纯化弓形虫RH株速殖子,接种于NIH3T3细胞单层,进行体外培养.接种4h后.换用pH8.1的碱性培养基进行速殖子向缓殖子的诱导转化培养,RT-PCR检测缓殖子蛋白1(BAG1)基因的表达.将诱导的缓殖子重新用pH7.2的培养基在常规环境下培养.诱导缓殖子向速殖子转化.为探索温度对速殖子向缓殖子转化的影响,将接种RH株速殖子的NIH3T3细胞分别放在37℃、39℃、41℃、43℃中诱导转化培养,RT-RCR检测BAG1基因的表达.结果 弓形虫RH株能在NIH3T3细胞单层中生长增殖,更换高pH值碱性培养环境后.能诱导弓形虫速殖子转化为缓殖子,RT-PCR检测出缓殖子期特异蛋白BAG1基因的表达,并且随着诱导时间的延长·BAG1基因mRNA的转录水平逐渐提高.表明有更多的速殖子转化为缓殖子.恢复pH7.2的常规培养条件.碱性诱导的缓殖子能转化为速殖子.在41℃诱导条件下,能诱导RH株速殖子转化为缓殖子.结论 成功构建弓形虫体外培养及速殖子与缓殖子相互转化体系,为转化机制的研究奠定基础.