人胚AGM区造血干/祖细胞的分离及其在含AGM区基质细胞体系中的培养

• 作者: 吴北燕 张绪超 陈惠芹 黄绍良
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 永久造血 主动脉-性腺-中肾区 造血干细胞 基质细胞 卵石区形成细胞
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 干/祖细胞生物学
• 页码范围: 579-583
• 页数: 5页
• 分类号: R318.04|R322.2
• 字数: 4276字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2008.03.026

摘要

本研究分离人胚主动脉-性腺-中肾(AGM)区遣血干/祖细胞(HSPC)并在含人AGM区基质细胞的培养体系中进行培养,以了解人AGM区基质细胞对HSPC的作用.以免疫组织化学方法检测人胎龄28-45天胚胎AGM区细胞CD34、Flk-1、VEGF的表达;分离AGM来源的HSPC,通过直接接种和经Transwell非直接接触两种方法接种于含人AGM区基质细胞系(hAGMS3和hAGMS4)饲养层的培养体系,观察HSPC生长情况和卵石区形成细胞(cobblestone area-forming cells,CAFC)并计数卵石区(cobblastone area,CA);用间接免疫荧光方法检测培养体系中悬浮细胞和CAFC的CD34、Flk-1表达;收获细胞进行半固体造血集落培养以检测两种培养方法对AGM-HSPC的集落形成能力影响.结果表明:人AGM区造血细胞表达CD34和Flk-1.两种接种方法均显示有CFC形成.直接接触培养能形成CD34和Flk-1双阳性的CAFC,集落总数明显高于非接触培养(hAGMS3体系:1 647±194 vs 389±31,P＜0.05;hAGMS4体系:1 586±75 vs 432±35,P＜0.05).结论:1人胚AGM区含有CD34+Flk-1+的HSC.2首次建立含人胚AGM基质细胞的AGM-HSPC培养体系,直接接触培养和非直接接触培养均能促进AGM-HSC的生长,AGM基质细胞与HSC直接接触发挥重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄绍良	中山大学附属第二医院干细胞研究中心	148	897	15.0	19.0
2	陈惠芹	中山大学附属第二医院干细胞研究中心	48	146	7.0	9.0
3	吴北燕	汕头大学医学院第一附属医院儿科	16	65	5.0	7.0
4	张绪超	广东省人民医院医学研究中心	24	88	6.0	8.0