摘要:
目的 该文旨在了解高苯丙氨酸(Phe)对大脑皮层神经元Nogo 66受体(NgR)表达的影响,以探讨NgR是否参与高Phe脑损伤的发病.方法 采取体外模拟高Phe(0.9 mM)环境,原代培养胎龄16~18 d的SD胎鼠皮层神经元,用免疫荧光方法观察高Phe作用0h,12h,24h之后神经元轴突长度和生长锥塌陷情况,并用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测高Phe作用0h,12h,24h和48h NgR mRNA和蛋白的表达情况.结果 ①高Phe作用12h,24h组神经元轴突长度与对照组相比明显变短(均P<0.05),0h,12h和24h生长锥塌陷比率分别为(3.5±1.5)%,(12.5±9.7)%和(24.1±4.5)%,12h组和24h组与对照组(0h组)相比,生长锥塌陷明显增多(P<0.01);②荧光定量PCR检测到高Phe作用12h,24h,48h神经元NgR mRNA与alpha.tubulin(α-Tub,α微管蛋白)的相对表达量轻度升高,但Ct值差异无显著性;③Western-blot检测发现高Phe作用12h,24h和48h的神经元NgR蛋白明显增加,12h,24h和48h组的相对比值分别为对照组的9.0,9.4,12.6倍(P<0.05).结论 高Phe可使神经元NgR受体表达增高,其可能为高Phe导致脑损伤神经元生长锥塌陷、突起生长减慢的机制之一.