西瓜花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

• 作者: 刘起丽 吴云锋 张建新
• 来源期刊: 河南师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 西瓜花叶病毒 外壳蛋白 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 117-119,123
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.46|S432.4
• 字数: 1899字
• 语种: 中文

摘要

利用RT PCR方法获得了西瓜花叶病毒(WMV)陕西分离物外壳蛋白(CP)基因,大小为843 bp.将CP基因克隆到pMD18 T Simple Vector,测序分析发现与各个国家CP核苷酸和氨基酸同源性分别为93.0%～95.0%和96.5%～98.6%.将CP基因定向插入EcoR I/Sal I切开的pET30a中,构建了原核表达载体pET30 WCP,转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导2～8 h后,成功表达了分子量约为37 kD的CP蛋白.通过不同时间诱导发现,加入IPTG 4 h后蛋白开始表达,8 h后表达量比较大.以诱导的蛋白为抗原免疫家兔,制备了WMV CP抗血清,ELISA法测其效价为1/6 400,Western blot分析能与CP发生血清学反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建新	河南师范大学生命科学学院	69	414	14.0	18.0
2	刘起丽	河南师范大学生命科学学院	3	20	3.0	3.0