人碱性成纤维细胞生长因子cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达

• 作者: 孔宁 张林 牟旭鹏 申茉函 韩东 颜炜群
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 成纤维细胞生长因子2 毕赤酵母 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 755-758
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆和表达人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF),以便进一步研究其功能.方法:从人神经胶质瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法,扩增出hbFGF cDNA片段,与pMD18-T载体连接后作DNA序列分析,并用亚克隆的方法构建pPICZα-hbfFGF,将测序正确的重组质粒用Sacl线性化后电转化至毕赤酵母X-33,经PCR法、SDS-PAGE和Western blotting分析表达产物,从而筛选出能够稳定、高效分泌表达hbFGF的酵母工程菌.结果:经测序证实获得的hbFGF序列与GenBank(登录号NM002006)报道的完全一致,甲醇诱导表达后培养液上清的SDS-PAGE凝胶电泳显示在相对分子质量约18 000有一蛋白条带,Western blotting结果显示表达产物与抗人碱性成纤维细胞生长因子抗体产生特异性条带,证明rhbFGF蛋白的表达.结论:成功克隆了hbFGF基因,并在毕赤酵母体系中进行了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	颜炜群	吉林大学药学院生物工程教研室	112	467	9.0	16.0
2	张林	吉林大学药学院生物工程教研室	44	2418	17.0	44.0
3	孔宁	吉林大学药学院生物工程教研室	17	31	2.0	3.0
4	韩东	吉林大学药学院生物工程教研室	21	115	7.0	10.0
5	牟旭鹏	吉林大学药学院生物工程教研室	13	36	3.0	5.0
6	申茉函	吉林大学药学院生物工程教研室	6	5	1.0	1.0