实时荧光PCR检测γ-干扰素对大鼠神经干细胞versican基因表达的调控

• 作者: 周慧君 陆佩华 顾文莉
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: SYBRGreen荧光染料 实时PCR versican 神经干细胞
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|Q344.13
• 字数: 3672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2008.02.005

摘要

目的 建立检测硫酸软骨素蛋白多糖versican不同亚型 mRNA的SYBR Green实时PCR方法,观察炎症因子γ-干扰素对大鼠神经干细胞中不同versican亚型基因表达的调控.方法 分离孕大鼠胚胎的神经干细胞,在含有营养因子的基质中进行体外培养.当加入处理因素γ-干扰素并作用48 h后,收集细胞,抽提RNA进行反转录.同时根据versican不同亚型的基因序列,设计特异性不同的引物,利用ABI7900PCR仪和SYBR Green,建立优化的实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct (△△Ct)进行基因表达的相对定量分析.结果 熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证实了PCR反应的特异性;相对定量结果显示,γ-干扰素可以上调versican V2基因的表达,但对versican V1的表达无影响.结论 应用SYBR Green 实时荧光PCR可以特异、准确、快速地分析versican不同亚型的基因表达差异,为系统研究其复杂的调控机制创造了有力条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆佩华	上海交通大学医学院神经生物学实验室	30	131	7.0	9.0
2	顾文莉	上海交通大学附属第九人民医院检验科	20	101	6.0	9.0
3	周慧君	上海交通大学附属第九人民医院检验科	6	51	5.0	6.0