Exendin-4与绿色荧光蛋白融合基因的表达与活性研究

• 作者: 垢敬 施丽捷 田菲
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 绿色荧光蛋白质类 基因表达 大肠杆菌 质粒 Exendin-4 胰高血糖素样肽-1受体
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 212-214,242
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2008.03.017

摘要

目的:表达具有双功能特性的Exendin-4-GFP融合蛋白.方法:构建融合表达载体pET21a(+)/Exendin-4-GFP,转化大肠杆菌BL21后,以IPTG诱导融合蛋白的表达,并利用镍金属螯合层析树脂对其进行纯化.采用胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)转染的CHO细胞考察融合蛋白的结合特性,并检测其生物活性.结果:含有融合表达载体的重组菌株诱导表达后,经SDS-PAGE及免疫印迹分析显示,31.0 ku的融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达,且具有Exendin-4的抗原活性.受体结合实验表明,该融合蛋白能够与GLP-1R特异性结合,在488 nm激发光下呈现绿色荧光.体内活性实验表明,融合蛋白具有明显的降血糖活性.结论:本研究表达的Exendin-4-GFP融合蛋白同时具有Exendin-4的活性和荧光特性,为研究GLP-1受体功能以及Exendin-4与细胞相互作用的机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田菲		87	554	12.0	19.0
2	垢敬		8	141	5.0	8.0
3	施丽捷		2	3	1.0	1.0