甜菜碱提高长距离PCR扩增效率的研究

• 作者: 刘卓刚 吴斌 徐秀月 李强 杨威
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血友病A 甜菜碱 LD-PCR
• 年，卷（期）: 2008,（17）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2924-2926
• 页数: 3页
• 分类号: R9
• 字数: 2311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2008.17.004

摘要

目的:利用甜菜碱优化长距离PCR(LD-PCR),提高血友病A(HA)基因倒位检测效率.方法:在LDPCR反应体系中加入DMSO、甘油及不同浓度的甜菜碱进行LD-PCR扩增,比较扩增结果.用甜菜碱优化LD-PCR检测正常人、不同程度HA患者及携带者的FⅧ基因是否存在FVE基因22号内含子(IVS22)倒位.结果:在反应体系中加入甜菜碱可获得更好的LD-PCR扩增结果:甜菜碱优化LD-PCR的最佳终浓度为0.8～1.8 mol/L;应用甜菜碱优化LD-PCR检出3例HA患者、2例携带者和1例可疑携带者FⅧ基因有IVS22倒位.结论:一定浓度的甜菜碱可以显著提高LD-PCR的扩增效率,提高检测出HA患者的FⅧ基因IVS22倒位的效率.