葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达

• 作者: 刘晓 席德慧 张中伟 杜俊波 杨辉 林宏辉 王建辉 蒋彧 袁澍 陈克玲
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 葡萄A病毒 ELISA RT-PCR 外壳蛋白基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 967-972
• 页数: 6页
• 分类号: S663.1
• 字数: 3402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0513-353X.2008.07.005

摘要

葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布.采集10株'藤稔'葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现,10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒.以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT-PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因(CP),该基因全长597 bp.将其与GenBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树,把不同地理起源的GVA分离物分成两个变异组,其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%～80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组(组内分离物具有84.4%～99.5%的序列同一性).构建了GVA CP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达.