重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK对人卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用

• 作者: 佟惠春 周丽君 曹阳 李光明 李冬田 李秋香
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢癌 重组腺病毒 E1A基因 自杀基因 SKOV3 细胞
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 223-227
• 页数: 5页
• 分类号: R737.31|R730.54
• 字数: 4310字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.03.005

摘要

目的:探讨含腺病毒基因E1A、融合自杀基因CDglyTK及报告基因GFP的重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK与酶前体药物5-FC和(或)GCV联合应用对人卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用.方法:将重组腺病毒质粒prAd-E1A-CDglyTK经脂质体介导转染293细胞,进行病毒的扩增、纯化与PCR鉴定,以紫外分光光度法与TCID50法测定纯化病毒的颗粒浓度与感染性滴度,计算病毒比活性;在SKOV3细胞中观察重组病毒的复制能力及感染效率,确定感染率达90%以上的最小MOI.用MTT法观察感染重组病毒的SKOV3细胞对5-FC或GCV的敏感性,并计算IC50;观察一定MOI的rAd-E1A-CDglyTK或重组复制缺陷型腺病毒rAd-CDglyTK与IC50的5-FC和(或)GCV联合应用对SKOV3细胞生长的抑制作用.结果:经PCR和琼脂糖凝胶电泳证实,纯化重组腺病毒中存在E1A和CDglyTK两个基因片段,其病毒颗粒浓度和感染性滴度分别为9.47×1011VP/ml和3.16×1010IU/ml,病毒比活性为3.34%.重组病毒可在SKOV3细胞中复制,对SKOV3细胞的感染效率随MOI的增加而增加,可致细胞感染率达90%以上的最小MOI为50 IU/cell.5-FC或GCV明显抑制感染细胞的生长,且存在明显的剂量依赖效应.两种重组腺病毒/前药系统的抑瘤作用比较显示,rAd-E1A-CDglyTK组细胞生长抑制率[(16.57±1.59)%]显著高于rAd-CDglyTK组[(10.44±1.80)%,P<0.01];与IC50的5-FC和GCV双药联合应用,其抑制率达(71.68±2.63)%,显著高于rAd-CDglyTK/5-FC+GCV组的(63.64±2.91)%(P<0.01).结论:重组腺病毒rAd-E1A-CDglyTK与酶前体药物联合应用对卵巢癌SKOV3细胞具有显著的抑制作用,其效果优于重组复制缺陷型腺病毒rAd-CDglyTK.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周丽君		1	3	1.0	1.0
2	李秋香		1	3	1.0	1.0
3	李冬田		1	3	1.0	1.0
4	李光明		1	3	1.0	1.0
5	佟惠春		1	3	1.0	1.0