人Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达及其对细胞生长的抑制

• 作者: 仲爱芳 朱传东 李晓军 汪萍 贾丽 陈龙邦
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分化抑制因子3基因(Id3) 肺癌细胞 增殖抑制 凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 527-531
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2|R730.54
• 字数: 3840字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2008.06.005

摘要

目的:研究外源性分化抑制因子3(Inhibitor of differentiation 3,Id3)基因表达对人肺腺癌细胞系A549细胞生长的抑制作用.方法:构建Id3和EGFP的融合基因表达载体pEGFP/Id3,采用脂质体转染技术将pEGFP/ Id3导入A549细胞.FCM分析转染细胞EGFP表达效率,荧光显微镜观察EGFP表达情况;半定量RT-PCR、免疫细胞化学分析转染后A549细胞Id3 mRNA和蛋白的表达.MTT法检测转染后A549细胞生长抑制情况,FCM分析A549细胞周期进程,Annexin V/7-AAD和Hoechst33258染色检测转染后细胞的凋亡情况.结果: 成功构建人Id3与EGFP融合基因表达载体pEGFP/Id3;荧光显微镜和FCM观察到EGFP的有效表达,转染48～72 h时EGFP表达率最高;Id3 mRNA及蛋白在转染后的A549细胞中能有效表达.转染后48 h和72 h,pEGFP/Id3转染组A549细胞生长受到明显抑制(P<0.01);细胞周期分析表明,pEGFP/Id3转染组G0/G1期细胞显著高于对照组(P<0.05); Annexin V/7-AAD双染结果显示,pEGFP/Id3转染组细胞的早期凋亡率[(10.67±2.60)%]显著高于pEGFP组[(3.39± 2.21)%]和未转染组[(2.35 ± 0.95)%](P<0.05);Hoechst33258染色结果也证实pEGFP/Id3组A549细胞出现明显凋亡形态特征.结论: 外源性Id3基因在肺腺癌A549细胞中的表达能抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡.