以睾酮为探针采用高效液相色谱法测定细胞色素CYP450 3A4的酶活性

• 作者: 刘昌辉 宓穗卿 张荣 王宁生
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 高效液相色谱法 睾酮 6β-羟基睾酮 细胞色素P450 3A4 肝微粒体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 80-83
• 页数: 4页
• 分类号: O658
• 字数: 3817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8713.2008.01.016

摘要

建立了一种快速、高效的以睾酮作为探针药物评价细胞色素P450 3A4(CYP3A4)酶活性的高效液相色谱-紫外检测方法.采用的色谱柱为Phenomenex C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),梯度洗脱,流速1.0 mL/min,紫外检测波长245 nm,柱温30 ℃.睾酮与大鼠肝微粒体温孵后,过已活化好的C18固相萃取小柱,收集甲醇洗脱液,于37 ℃水浴中通N2吹干,用50%甲醇复溶后进样分析测定.研究结果表明,6β-羟基睾酮的保留时间为11.60 min,线性范围为0.5～32 μg/mL,最低检出质量浓度为0.02 μg/mL,提取率为88.41%～92.73%,方法的回收率为99.07%～101.30%;睾酮的保留时间为19.27 min,线性范围为0.5～40 μg/mL,最低检出质量浓度为0.01 μg/mL,提取率为89.59%～92.66%,方法的回收率为96.50%～98.03%.两者的日内、日间相对标准偏差均小于10%,温孵体系中的其他内源性物质不干扰测定.该方法快速、稳定、灵敏度高,适合体外睾酮及其代谢物6β-羟基睾酮的测定,可应用于体外CYP3A4酶活性的评价及酶动力学的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁生	广州中医药大学临床药理研究所	177	2980	29.0	47.0
2	宓穗卿	广州中医药大学临床药理研究所	135	2082	25.0	42.0
3	张荣	广州中医药大学临床药理研究所	42	274	8.0	16.0
4	刘昌辉	广州中医药大学临床药理研究所	25	98	5.0	9.0