缺氧对人视网膜色素上皮细胞蛋白质表达的影响

• 作者: 丁振强 何守志 侯豹可 唐维强
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脉络膜新生血管化 色素上皮,眼 细胞低氧 蛋白质组 监控蛋白60 电泳,凝胶,双向 光谱分析,质量
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 534-539
• 页数: 6页
• 分类号: R77
• 字数: 5303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-4081.2008.06.013

摘要

目的 为揭示缺氧对视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响及与脉络膜新生血管(CNV)生成的关系提供实验依据.方法 实验研究.分别从对数生长期的正常及缺氧状态人RPE细胞中提取蛋白样本后行等电聚焦电泳(IEF),随后采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行第二次分离.采用考马斯亮蓝染色法对凝胶进行显色固定,Image Master 2D Elite软件行分析配比,筛选出正常和缺氧RPE细胞表达明显差异的蛋白质斑点,随机选取差异斑点进行质谱分析,数据经蛋白质组数据库检索得出蒡异表达蛋白.结果 正常组分离蛋白斑点578个,组内匹配率92.90%;缺氧组559个,匹配率91.41%;两组间蛋白斑点匹配率为85.47%.发现volume值改变超过2倍的点共92个,其中32个点表达卜调,60个点表达下调.选择7个蛋白斑点行质谱分析,成功鉴定5种差异表达蛋白质(3个斑点为相同的蛋白):表达上调为热休克蛋白70、热休克蛋白60;表达下调的为β肌动蛋白、β微管蛋白以及过氧化还原蛋白3.结论 缺氧状态下RPE细胞表达差异蛋白可引起细胞应激能力明显增强,而主要细胞骨架蛋白下调,细胞维持形态、保持内部结构有序性的能力下降;本研究首次发现人RPE细胞在缺氧状态下热休克蛋白60表达上调,此蛋白的进一步研究可能能够发现新的CNV致病途径;蛋白质组学方法为CNV相关疾病的研究提供了-个很好的参考平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何守志	解放军总医院眼科	72	456	11.0	18.0
2	丁振强	解放军总医院眼科	7	19	2.0	4.0
3	侯豹可	解放军总医院眼科	17	85	5.0	8.0
4	唐维强	解放军总医院眼科	10	22	3.0	3.0