沼气池宏基因组文库中未培养微生物β-葡萄糖苷酶基因的克隆与鉴定

• 作者: 唐成来 李双喜 武波 罗奉奉 蒋建林 车志群
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 生物学
• 关键词: 沼气池 宏基因组文库 β-葡萄糖苷酶
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 植物生理学与分子生物学
• 页码范围: 790-794
• 页数: 5页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 3510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3142.2008.06.017

摘要

以间接提取法提取了沼气池样品的微生物宏基因组DNA,用柯斯质粒载体pWEB:TNC构建了一个含三万个克隆的沼气池宏基因组文库,对文库中的克隆随机分析表明,该文库的外源片段平均长度为40 kb,文库的总容量为1.2×106 kb.对其中的一个在七叶苷平板上显色的阳性克隆pGXN100进行进一步亚克隆、测序和序列分析.结果表明,pGXN100上有一个全长为1 863 bp的ORF,编码621个氨基酸组成的蛋白质.将该基因命名为Unglu100.与产气克雷伯菌属的一个β-葡萄糖苷酶基因AN292在核苷酸和氨基酸水平上分别有76%和85%的同源性,利用SMART软件进行预测表明,Unglu100可能是PTS中β-葡萄糖苷酶特异性的转运蛋白组件.