人HSC70基因真核表达载体的构建和表达

• 作者: 张景霞 李端 王安辉 苏海霞 闫永平
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HSC70 肝细胞 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 398-401
• 页数: 4页
• 分类号: R730.2
• 字数: 3102字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.04.004

摘要

目的 构建HSC70(HSC)真核表达质粒,并在HepG2细胞中表达.方法 采用KT-RCR方法 从正常人肝细胞系QZE中得到HSC70的CDNA序列,然后,克隆入pcDNATM3.1/V5-HisA载体,构建重组质粒pcDNA-HSC70;经酶切和测序鉴定后,将pcDNA-HSC70体外转染HepG2细胞系,瞬时表达带有His标签的HSC70融合蛋白;并通过免疫细胞化学方法 检测蛋白表达情况.结果 RT-PCR扩增到1960 bp的HSC70cDNA片断,经测序分析与GenBank中已知序列一致;重组质粒pcDNA-HSC70转染后的HepG2细胞中,可检测到瞬时表达的HSC70-His融合蛋白.结论 成功构建重组质粒pcDNA-HSC70,并可以在真核细胞HepG2中瞬时表述.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王安辉	第四军医大学预防医学系流行病学教研室	58	400	12.0	16.0
2	李端	第四军医大学预防医学系流行病学教研室	37	272	9.0	14.0
3	闫永平	第四军医大学预防医学系流行病学教研室	122	904	15.0	23.0
4	张景霞	第四军医大学预防医学系流行病学教研室	42	204	8.0	12.0
5	苏海霞	第四军医大学预防医学系流行病学教研室	33	212	9.0	13.0