慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞及其培养

• 作者: 任萍 关云谦 张愚 朱宛宛 朱宝长 李宁 王淑艳
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 人胚胎干细胞 绿色荧光蛋白 慢病毒
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1083-1087
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 2714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2008.10.017

摘要

目的 稳定培养人胚胎干细胞,并通过慢病毒载体对其进行绿色荧光蛋白标记.方法 利用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层或Matrigel作为基质培养人胚胎干细胞,包装带有GFP序列的慢病毒转染人胚胎干细胞.对转染前后的人胚胎干细胞进行了碱性磷酸酶和SSEA-3免疫组化鉴定.结果 在MEF饲养层和Matrigel上均可培养出呈克隆样生长,表达标志抗原的人胚胎干细胞,经慢病毒转染及抗生素筛选后仍可稳定表达GFP.结论 成功地培养了人胚胎干细胞系,并进行了GFP标记.