突变对嗜热古菌蛋白[P62A]Ssh10b主链构象影响的核磁共振研究

• 作者: 方显扬 王金凤 罗权 邓志威
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: D51N突变 [D51N/P62A]Ssh10b 核磁共振 主链指认 化学位移比较
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 546-550
• 页数: 5页
• 分类号: O657.2|Q501
• 字数: 3822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2008.03.023

摘要

嗜热古菌蛋白Ssh10b突变体[P62A]Ssh10b具有良好的热稳定性.[P62A]Ssh10b的结构测定结果显示,其α 2螺旋上残基K48和D51之间形成了一对盐键,而且,突变D51将影响蛋白的热稳定性.为了探索D51的突变对蛋白热稳定性的影响,构建了突变体[D51N/P62A]Ssh10b的质粒,并获得了高纯度的15N和13C双标记[D51N/P62A]Ssh10b.通过对异核三共振NMR实验数据的解析,完成了对[D51N/P62A]Ssh10b的主链共振近乎完全的指认.比较突变以及未突变蛋白质的主链1HN和15N化学位移,在[P62A]Ssh10b的结构基础上进行分析发现,D51N突变显著地影响了α 2螺旋骨架构象,并进一步影响到古菌L β2α 2loop区域、β4 的N端区域、 L β3β4 loop的C端区域以及β 3与L β3β4 loop的交界区域.结果表明,由于D51N突变破坏了α2 螺旋上K48和D51之间的盐键,影响了[D51N/P62A]Ssh10b的α2 螺旋构象,并影响到蛋白的其它相关部位的局部构象,说明 [P62A]Ssh10b 的高热稳定性可能与其溶液构象密切相关.为进一步运用NMR研究[D51N/P62A]Ssh10b分子结构特性与耐热机制间的关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓志威	北京师范大学分析测试中心	76	1668	19.0	40.0
2	罗权		4	14	3.0	3.0
6	方显扬		1	0	0.0	0.0
7	王金凤		1	0	0.0	0.0