RNAi沉默PSMA基因对前列腺癌LNCaP细胞生物学行为的影响

• 作者: 丘少鹏 张甜 徐霖 曹开源 田小东 袁广卿 黄小荣
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 前列腺癌特异膜抗原 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1877-1881
• 页数: 5页
• 分类号: R737.25
• 字数: 3633字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.10.002

摘要

目的:构建LNCaP细胞PSMA基因的shRNA真核表达载体,探讨其对LNCaP细胞中PSMA基因表达的干扰作用.方法:针对PSMA mRNA序列设计合成3对编码shRNA的寡核苷酸链,退火形成双链,连接入含有BamH I和HindⅢ酶切位点的pSilencer 2.1-U6-neo真核表达载体,双酶切及测序鉴定.使用脂质体转染的方法将重组质粒导入LNCaP细胞,G418筛选后RT-PCR、Western blotting检测其对PSMA基因干扰作用,并观察对LNCaP细胞生物学行为的影响.结果:经酶切及测序鉴定,成功构建shRNA 真核表达载体p-shRNAI,2,3转染LNCaP后,对细胞PSMA mRNA表达抑制率分别为33.15%、9.26%、41.97%,Western blotting结果显示对PSMA蛋白表达的抑制率分别为26.26%、6.47%、40.69%.选择抑制效率较高的P-shRNA3进行体外生长及侵袭力实验,发现干扰后对LNCaP细胞侵袭力增强,但是对细胞生长影响不大.结论:成功构建了人PSMA基因的RNAi的真核表达载体,并在LNCaP细胞中有效地发挥了对PSMA基因表达的十扰作用,初步发现PSMA在前列腺癌的侵袭中起负向调节作用,为进一步研究PSMA的生物学功能,探索前列腺癌的发病机制奠定一定的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹开源	中山大学中山医学院临床检验标准化研究中心	61	218	8.0	10.0
2	徐霖	中山大学中山医学院免疫教研室	37	123	6.0	9.0
3	袁广卿	中山大学中山医学院实验教学中心	38	216	7.0	12.0
4	张甜	中山大学中山医学院临床检验标准化研究中心	6	26	4.0	5.0
5	黄小荣	中山大学中山医学院实验教学中心	37	191	7.0	12.0
6	田小东	中山大学中山医学院临床检验标准化研究中心	3	15	3.0	3.0