一种直接检测结核病痰标本的PCR技术的建立与评价

• 作者: 万康林 刘志广 张媛媛 张选民 曾令城 杜新玲 王艳 王西临 赵秀芹 韩跃玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链式反应 结核病 痰标本
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1017-1021
• 页数: 5页
• 分类号: R446.5
• 字数: 4384字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.11.007

摘要

目的 建立并评价聚合酶链式反应(polymerase chain reaction ,PCR)在结核病痰标本检测中的应用价值.方法 根据结核分枝杆菌复合体IS6110序列设计引物INS1和INS2,并建立PCR反应体系和反应条件.运用PCR方法分别检测标准菌株、结核分枝杆菌PCR检测标准品和拟诊结核病患者痰标本,采用痰涂片和细菌培养为对照.结果 比较的统计学分析采用卡方检验.结果PCR方法对结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、卡介苗标准株的最小检出浓度分别达到102,103,103个细菌/毫升,能够特异地检出结核分枝杆菌复合体.在PCR检测的574例拟诊病例中,PCR检测阳性病例241例,42%;痰涂片和细菌培养的阳性率分别为19.69%和26.31%,PCR检测阳性率高于传统细菌学检验方法,经χ2检验,差异具有显著统计学意义(χ2=103.67,P<0.01).以痰培养结果为标准,计算PCR检测方法 的敏感度为67.53%.结论 PCR检测方法与传统的细菌学检测方法相比可以提高阳性标本检出率,而且具有快速、特异、简便的特点,有望成为结核病大规模筛查和临床快速检测方法.