构建变形链球菌psm基因同源重组质粒的实验

• 作者: 刘筱娣 段劲 郭丽宏 陈伟
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 链球菌,变异 基因 质粒 重组,遗传
• 年，卷（期）: 2008,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3918-3921
• 页数: 4页
• 分类号: R378.12
• 字数: 3969字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.20.029

摘要

背景:为了深入研究磷酸蔗糖变位酶基因psm与变形链球菌S.mutans致龋性之间的关系,需要利用同源重组原理构建psm基因功能丧失菌株,因此构建一个符合同源重组条件的合格质粒载体就成为实验工作的重要前提.目的:构建变形链球菌S.Mutans UA159 psm的两种同源重组质粒.设计、时间及地点:于2005-12/2006-07在北京大学医学部病原微生物实验室完成的单一样本观察实验.＃材料:实验所用口腔链球菌均来自四川大学华西口腔医学院微生物实验室.方法:首先应用Southern Blot对psm基因的保守性进行分析,再将S.Mutans UA159 psm基因内部序列分别克隆至自杀质粒pSF151和pVA981上的多克隆位点,构建重组质粒.主要观察指标:psm基因的保守性及重组质粒pSF151及pVA981的构建结果.结果:psm基因在实验中所列8种S.Mutans中保守存在;经过聚合酶链反应和酶切分析,两个重组质粒所插入片断无误.重组质粒pSF151(空质粒大小为3.5kbp)和pVA981(空质粒大小为7.1kbp)构建成功.结论:两种可以用于转化S.Mutans UA159的重组质粒的构建可用于今后S.Mutans UA159 psm基因功能的研究,且重组质粒大小是否影响转化效率需后续观察.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭丽宏	北京大学口腔医学院	18	121	7.0	10.0
2	段劲		8	9	1.0	2.0
3	刘筱娣	北京大学口腔医学院	7	25	3.0	4.0
4	陈伟		3	5	1.0	2.0