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摘要:
目的:构建人类维甲酸受体α基因的高效表达系统.方法:提取人肝组织总RNA,RT-PCR扩增Retinoid X receptor α(RXRα)的cDNA.将其克隆入原核表达载体pETDuet-1,构建重组表达载体pETDuet-1 /RXRα.将已构建好的表达载体pETDuet-1 /RXRα重组质粒转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代-8-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Western Blot鉴定表达产物.结果:重组载体pETDuet-1 /RXRα经限制性核酸内切酶BglⅡ和 AatⅡ双酶切鉴定,得到符合预期大小的核酸片段.SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,Western Blot证实该条带即为RXRα.并对重组质粒pETDuet-1 /RXRα在BL21菌株的表达效率进行评价,目的蛋白占菌体总蛋白的百分比为65.8%.结论:成功建立了pETDuet-1/RXRα的高效表达系统.
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文献信息
篇名 人类维甲酸受体α的克隆表达
来源期刊 西北国防医学杂志 学科 医学
关键词 人类维甲酸受体α 逆转录PCR 限制性内切酶 基因表达
年,卷(期) 2008,(5) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 357-360
页数 4页 分类号 R915
字数 3339字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王君霞 兰州军区兰州总医院儿科 55 170 7.0 11.0
2 韩跃武 兰州大学基础部生物化学与分子生物学教研室 44 138 6.0 8.0
3 郭林梅 兰州大学基础部生物化学与分子生物学教研室 1 2 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
人类维甲酸受体α
逆转录PCR
限制性内切酶
基因表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
西北国防医学杂志
双月刊
1007-8622
62-1033/R
大16开
兰州市南滨河中路333号
54-101
1979
chi
出版文献量(篇)
6498
总下载数(次)
6
总被引数(次)
16755
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