纳米载体介导的人端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用及端粒酶表达的影响

• 作者: 刘宇琼 周天洋 张振中 李惠翔 王瑾
• 来源期刊: 中华肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚乙烯亚胺 端粒酶逆转录酶 反义寡核苷酸 NGR 食管癌细胞系EC9706
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 566-572
• 页数: 7页
• 分类号: R73
• 字数: 7600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3766.2008.08.003

摘要

目的 探讨纳米载体介导的人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因反义寡核苷酸(ASODN)在体内外对食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用及端粒酶表达的影响.方法 制备线型聚乙烯亚胺(L-PEI)/ASODN纳米级复合物及NGR修饰的L-PEI/ASODN靶向纳米复合物,转染人食管癌细胞系EC9706.采用激光共聚焦显微镜观察细胞对纳米复合物的摄入情况,通过二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法分别检测hTERT mRNA和蛋白的表达情况,Annexin V-FITC/PI双标法检测凋亡细胞.通过体内药物分布实验和抑瘤实验观察NGR的靶向肿瘤细胞作用、裸鼠移植瘤的生长情况、组织形态学和超微形态学改变.结果 共聚焦显微镜观察可见,L-PEI可以保护hTERT ASODN有效进入细胞核内;N/P=10、ASODN终浓度40 μg/ml的L-PEI/ASODN复合物转染细胞后24、48、72和96 h,增殖抑制率分别为45.6%、55.8%、67.0%和83.1%;L-PEI/ASODN转染组hTERT mRNA水平明显降低,hTERT条带与内对照条带灰度值的比值为0.27±0.04,与空白对照组、ASODN转染组和L-PEI/SODN转染组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.05),hTERT蛋白不表达;转染48 h后,L-PEI/ASODN转染组细胞凋亡明显,早期凋亡率和晚期凋亡率分别为38.0%和52.2%.NGR修饰的L-PEI/ASODN-FAM纳米复合物注射于荷瘤小鼠,其靶向肿瘤作用明显;给药8 d后,NGR/L-PEI/ASODN静脉给药组和皮下给药组的肿瘤体积均明显小于生理盐水组和NGR/L-PEI/SODN组(均P＜0.05);超微结构观察可见典型凋亡小体.结论 NGR修饰、L-PEI介导下的hTERT ASODN可抑制EC9706细胞的增殖,降低其端粒酶的表达,还可有效到达裸鼠人食管癌移植瘤内,抑制肿瘤的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李惠翔	郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室	74	256	8.0	10.0
2	周天洋	郑州大学药学院	9	26	2.0	4.0
3	张振中	郑州大学药学院	118	452	10.0	14.0
4	王瑾	郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室	20	35	4.0	5.0
5	刘宇琼	郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室	11	28	3.0	4.0